Transmisja MERS-Coronavirus w kontaktach domowych AD 2

Jakiekolwiek niezauważone przenoszenie wirusa w populacji mogłoby wyjaśnić, dlaczego nowo zidentyfikowane przypadki indeksu często nie mogą być powiązane z ekspozycją na zoonoty. Jednak do tej pory brak narzędzi serologicznych uniemożliwił dogłębne zbadanie wskaźników transmisji wtórnej. W celu określenia częstości występowania wtórnej infekcji cichej lub podklinicznej po ekspozycji na pierwotne przypadki zakażenia MERS-CoV, przeprowadziliśmy przekrojowe badanie laboratoryjne 280 kontaktów domowych z 26 pacjentami wskaźnikowymi, z dalszą uzupełniającą analizą serologiczną w 44 kontaktach. Wszystkie kontakty testowano pod kątem obecności i ilości wirusowego RNA w próbkach wymazów z gardła i przeciwciał we krwi za pomocą stopniowanego algorytmu serologicznego, który oparty jest na wynikach testów immunoenzymatycznych (ELISA), testów immunofluorescencyjnych, i test neutralizacji blaszki miażdżycowej (PRNT).
Metody
Pa cjenci
Klastry kontaktu domowego były związane z 26 pacjentami wskaźnikowymi, u których rozpoznano zakażenie MERS-CoV od 4 czerwca 2013 r. Do 5 listopada 2013 r., Z jednym klastrem na pacjenta. Mediana daty poboru próbnych klastrów przypada na 8 września 2013 r. Rozpoznanie u pacjentów z indeksem opierało się na hospitalizacji z obustronnym zapaleniem płuc i wykryciu MERS-CoV w próbkach oddechowych w reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą (RT-PCR). Wszystkie kontakty domowe pacjentów z indeksami (którzy zostali zdefiniowani jako osoby mieszkające w tym samym domu, niezależnie od stopnia powiązania z pacjentem wskaźnikowym) były zobowiązane do udziału w dochodzeniu na podstawie rozporządzenia Ministerstwa Zdrowia w ramach publicznej reakcji zdrowotnej . Klastry miały miejsce w Rijadzie (16 klastrów), Dammam (3), Al-Hasa (2), Hafr Al-Batin (2), Jubail (2) i Dżuddzie (1).
Test RT-PCR MERS-CoV
Przeprowadziliśmy testy R T-PCR na RNA, który został wyekstrahowany z wymazów z górnych dróg oddechowych, z badaniem na genomowy region MERS-CoV powyżej genu otoczki (upE) oraz w otwartej ramce odczytu (ORF) 1a, jak opisano powyżej.5, 6 Potwierdzenie wyników upE przez wykrywanie ORF1a wymagało ponownej ekstrakcji RNA z oryginalnych próbek.
Pełny test immunofluorescencyjny wirusa
Testy immunofluorescencyjne przeprowadzono ze szkiełkami niosącymi komórki Vero zainfekowane pełnym MERS-CoV, jak opisano wcześniej, 6 i wytworzono w homogenicznym formacie odczynników przez firmę zajmującą się diagnostyką in vitro, w celu poprawy spójności między seriami (MERS IIFT, Euroimmun). Predukcja surowicy wynosiła 1: 100.
Test rekombinowanej immunofluorescencji
Przeprowadziliśmy testy rekombinacji immunofluorescencji w celu określenia specyficznej reaktywności wobec rekombinowanych białek wypustek w komórkach VeroB4, jak opisano wcześniej.6 Rozcieńczenie przesiewow e wynosiło 1:40 [podobne: leczenie chrapania warszawa, amyloza, certolizumab ]

Powiązane tematy z artykułem: amyloza certolizumab leczenie chrapania warszawa